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        紫外吸收檢測(cè)器又叫紫外分光光度計(jì)

        2010-12-24

                                        紫外吸收檢測(cè)器又叫紫外分光光度計(jì)
             這是應(yīng)用廣泛的檢測(cè)器,測(cè)定組分在190~350nm的紫外光吸收。也可以向可見(jiàn)光延伸(350~700nm),這種類型的檢測(cè)器稱為紫外可見(jiàn)光檢測(cè)器,在可見(jiàn)光區(qū)靈敏度比較低。
          為了引進(jìn)“色譜”概念,曾在本書開(kāi)篇提到太陽(yáng)光的組成。這里又提到太陽(yáng)光的組成,討論的僅是純光譜與紫外檢測(cè)器相關(guān)的問(wèn)題。在太陽(yáng)光中有一段紫外-可見(jiàn)光區(qū),波長(zhǎng)在190~750nm之間,紫外區(qū)的波長(zhǎng)在190~350nm之間。紫外區(qū)(100~200nm)和近紫外區(qū)(200~400nm)。遠(yuǎn)紫外區(qū)的紫外光完全被空氣吸收,測(cè)定組分的紫外的紫外吸收需在真空的條件下。
          1、紫外吸收檢測(cè)器能夠檢測(cè)什么樣的組分?含有雜原子又鍵原子上有未成鍵電子的組分,或者不飽和烴類,在受紫外光照射后,這些化合特的未成鍵電子,或者不飽和又鍵的軌道電子吸收能量后能躍入反鍵軌道。具有這種性質(zhì)的組分就可以用紫外吸收檢測(cè)器檢測(cè)。
          2、電子躍遷的形式和紫外吸收波長(zhǎng)的差別  含有雜原子雙鍵的組分在雜原子上未成鍵電子對(duì)中一個(gè)電子吸收能量躍入反鍵軌道,產(chǎn)生紫外吸收
          3、紫外吸收檢測(cè)器的結(jié)構(gòu)  紫外吸收檢測(cè)的基本結(jié)構(gòu):一個(gè)發(fā)射紫外光的燈(汞燈、氘燈、氙燈),就是檢測(cè)器的光源。選擇檢測(cè)波長(zhǎng)的單色器,就是棱鏡。只能讓一種波長(zhǎng)的光通過(guò)狹縫到達(dá)樣品池。透過(guò)樣品池的光再照射到檢測(cè)器的光電敏感器。
          光源發(fā)出的光通過(guò)棱鏡分解折射出不同波長(zhǎng)的光,經(jīng)過(guò)狹縫縫調(diào)節(jié)后,只能讓對(duì)某(類)組分有大吸收波長(zhǎng)(檢測(cè)波長(zhǎng))的光通過(guò)狹縫照射到樣品池上,樣品池中的組分吸收了該波長(zhǎng)的光,使其通過(guò)樣品池后強(qiáng)度下降,使用權(quán)得檢測(cè)中的光電敏感元件輸出電流發(fā)生改變。這種改變就是測(cè)定的結(jié)果,這種改變符合比爾定律。
           棱鏡放在樣品池前的紫外吸收檢測(cè)器通常稱為紫外分光光度計(jì)或紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)。
           這種檢測(cè)器設(shè)計(jì)成雙光路,一路是測(cè)量池光路,另一路是參比池光路,兩光路是對(duì)等的。光源發(fā)出的光以完全相等的兩束光投射到測(cè)量池和參比池上,若兩池中都是純流動(dòng)相(有的參比池中充滿空氣作為參比物),它們的吸收值是相等或幾乎沒(méi)有吸收,則兩光照射到光電敏感器上的強(qiáng)度相等,無(wú)信號(hào)輸出。即使有噪聲也相互抵消,色譜上的基線是平衡的。當(dāng)組分進(jìn)入測(cè)量池后會(huì)吸收紫外光使兩邊的光電敏感器接受到的照射強(qiáng)度不等,像天平一樣失去平衡,電路上產(chǎn)生電流補(bǔ)償,于是就產(chǎn)生了信號(hào)。
           有了參比池可以減小紫外檢測(cè)器的噪聲,抵抗外來(lái)干擾,提高檢測(cè)器的敏感度。
           棱鏡放在樣品池后,不需要在棱鏡后面加狹縫。這樣放置的棱鏡稱多電器,也中全息光柵。檢測(cè)器是排成一組陣列的二極管,第個(gè)二極管可以看成是一個(gè)檢測(cè)單元。光源發(fā)出的光通過(guò)樣品池后照射到多色器上被子分解折射出不同波長(zhǎng)的單色光。通過(guò)連續(xù)掃描每個(gè)二極管都接收到的波長(zhǎng)不同、強(qiáng)度不同的光,被測(cè)定的組分通過(guò)樣品池后的吸收紫外光的情況能夠由多色器全波長(zhǎng)分解掃描表現(xiàn)出來(lái),不需要再設(shè)定特定的波長(zhǎng)。這種檢測(cè)器稱二極管陣列檢測(cè)器。
           使用二極管陣列檢測(cè)器一次就可獲得吸光度、保留時(shí)間。除了顯示二維色譜峰外,還可以轉(zhuǎn)換成三維色譜圖,更有利于定性。
           二極管陣列檢測(cè)器的三維色譜圖可以360度轉(zhuǎn)動(dòng),既能橫切,也能夠縱切檢查色譜峰的純度。比紫外分光光度計(jì)檢查峰純度方便多了。用紫外分光光度計(jì)檢查色譜峰的純度需取色譜峰的三個(gè)點(diǎn)分別紫外掃描檢查紫外光譜的一致性。
           二極管陣列檢測(cè)器也可以設(shè)計(jì)成有參比池雙光路的形式,光路比較復(fù)雜。二極管陣列檢測(cè)器不需要轉(zhuǎn)動(dòng)單色器,不會(huì)因復(fù)雜的機(jī)械傳動(dòng)引起光譜測(cè)量波長(zhǎng)的誤差。與紫外分光光度計(jì)相比,二極管陣列檢測(cè)器還有以下優(yōu)點(diǎn):
            掃描速度快。從190nm到280nm僅需0.1s,這是普通分光光度計(jì)無(wú)法比擬的。
           可同時(shí)進(jìn)行多波長(zhǎng)測(cè)定。這為分離測(cè)定低濃度組分提供了更可靠的結(jié)果。如樣品中某組分的含量相當(dāng)?shù)停?nbsp; 大吸收波長(zhǎng)為520nm,而在250nm處測(cè)定該組分的三種不同低濃度樣品,誤差很大。若從520nm到610nm間有參比測(cè)定,誤差明顯減小。若在紫外吸收光譜線上分兩段參比測(cè)定:500~530nm;600~640nm。三種濃度的測(cè)定結(jié)果幾乎在一條直線上。
            二極管陣列檢測(cè)器重現(xiàn)性好咖啡因?yàn)?74nm,再另選波長(zhǎng)284nm,用這兩種波長(zhǎng)同時(shí)測(cè)定同一濃度的咖啡因30個(gè)樣品,經(jīng)統(tǒng)計(jì)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)完全一樣。
            二極管陣列檢測(cè)器的靈敏度一般低于高普通的紫外分光光度計(jì)。
           供給紫外檢測(cè)器光源的燈和普通照明燈一樣有使用壽命,報(bào)廢前會(huì)產(chǎn)生有規(guī)律的噪聲。

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